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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡要描述：
人為地在融合的單層細(xì)胞上制造一個(gè)空白區(qū)域，邊緣的細(xì)胞會(huì)逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕"愈合，又名傷口愈合實(shí)驗(yàn)（Wound-Healing Assay）細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是目前測定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的zcy也是zjd的方法，科研中常常用來觀察某外源因素對(duì)細(xì)胞遷移影響。
更新時(shí)間：2024-03-22
訪問量：957
廠商性質(zhì)：其他
實(shí)驗(yàn)步驟
標(biāo)記六孔板
用marker筆在六孔板底部畫平行線，平行線之間的距離0.5cm，為了保證后續(xù)拍照位置是相同的；
鋪板
細(xì)胞重懸鋪板，密度控制在第二天長滿，若過夜后細(xì)胞wq長滿，也可以適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間，但如果細(xì)胞密度已經(jīng)很大，盡量重新鋪板，因?yàn)榭赡苓^一天后細(xì)胞太滿，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)逐漸變差，后續(xù)細(xì)胞可能不遷移而是凋亡；
制造劃痕
第二天用直尺比著使用10ul槍頭制造劃痕，劃痕方向與標(biāo)志線垂直，保持力度一致，盡量一次性劃完，然后PBS沖洗3次，洗去漂浮的細(xì)胞
為了減少細(xì)胞增殖所引起的假陽性結(jié)果，降低細(xì)胞增殖對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，將wq培養(yǎng)基換成無血清培養(yǎng)基和低血清培養(yǎng)基（FBS＜2%繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞）；
拍照
拍照前用PBS沖洗3次，一般認(rèn)為24h為細(xì)胞的一個(gè)周期，所以檢測時(shí)間不要超過一個(gè)周期的時(shí)間，按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕
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